Localizacion celular de las enzimas

Criterios para trabajar con enzimas.

Es el paso esencial en la técnica de estudio de una enzima. Se observa que la velocidad disminuye con el tiempo:. Varias causas pueden contribuir a que se produzca esta disminución:. A causa de esto se hace difícil derivar una ecuación que responda a la curva.


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Entonces se recurre a la medición de la velocidad inicial : sólo al comienzo de la reacción, cuando los factores mencionados no han tenido tiempo de actuar, las condiciones se conocen con precisión. Esto permite determinar qué efecto produce sobre la velocidad inicial la variación de solo un factor, manteniendo al resto constante. Por ejemplo, se estudia el efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad inicial.

Introducción

Cuando ha transcurrido cierto tiempo y la concentración de sustrato disminuye, o bien cuando se parte de concentraciones de sustrato menores, la velocidad es función de la cantidad de sustrato presente. El éxito del trabajo con enzimas depende del cuidado con que se eviten las condiciones en las cuales son inestables. Durante el aislamiento y la purificación conviene, en general, trabajar entre 0 y 4 o C y evitar pH mayor que 9 o menor que 5. Para estudiar una en particular, se hace indispensable entonces un proceso de purificación. Para decidir si un paso de la purificación tiene sentido, es necesario medir la cantidad de enzima y la cantidad de impurezas antes y después de ese paso, y comparar los resultados de varios procedimientos posibles.

La actividad de una enzima depende de condiciones tales como temperatura, pH, concentración; por lo tanto es necesario especificarlas y usar las mismas condiciones para comparar actividades. Es necesario usarlo en concentración tal que sature la enzima, de modo que la velocidad sea independiente de la concentración de sustrato y proporcional a la cantidad de enzima.

Es la cantidad de enzima que cataliza la formación de una determinada cantidad de producto desaparición de reactivo en un tiempo dado. Para estudios mecanísticos generales, debe seleccionarse aquella fuente que sea rica en la enzima. Frecuentemente una buena elección de la fuente de enzima permite simplificar la extracción y purificación de la enzima. Las enzimas pueden localizarse dentro de los siguientes grupos:.

Las Enzimas

Enzimas en solución verdadera en el citoplasma. Permanecen en el sobrenadante luego de la eliminación de los componentes particulados.


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La ruptura de las células en un buffer adecuado libera tales enzimas al medio. Enzimas asociadas a estructuras celulares membranas, mitocondrias, etc. Para pasarlas a solución debe disociarse el complejo. El conocimiento de la localización intracelular y solubilidad relativa de las enzimas ha permitido desarrollar procedimientos de extracción diferencial que facilitan la purificación. Las condiciones para extraer las enzimas y pasarlas a solución son a menudo críticas y requieren el estudio de muchas variables. Respuestas intracelulares a moléculas de señalización celular, como las proteína-quinasas , que fosforilan proteínas diana.

El propio Garnier notó que la basofilia variaba de unas células a otras, y, dentro de una misma célula, se incrementaba al aumentar la síntesis proteica de esa célula. Inicie sesión mediante OpenAthens Inicie sesión mediante Shibboleth Obtenga acceso gratuito por medio de su institución Pregunte en la biblioteca de su institución si tienen una subscripción a los Productos médicos de McGraw-Hill.

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